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在掃描電鏡分析中，有機物的分析一直是一個難題?，F(xiàn)在隨著電鏡低電壓的能力越來越強，已經(jīng)能解決有機物的荷電以及電子束輻照損傷問題，對形貌的表征不再是難事。但是對有機物除形貌之外的分析依然是個難題，因為能譜的元素分析功能對有機物的表征起不了太大作用。

而拉曼光譜是除了紅外光譜以外，另一個可以很好地進行有機結(jié)構(gòu)解析的表征手段。因此RISE拉曼-電鏡一體化系統(tǒng)相比一般的SEM系統(tǒng)，對有機物的分析能力就有了極大的拓展。

有機物的結(jié)構(gòu)分析主要是碳骨架結(jié)構(gòu)和特殊官能團的解析。碳結(jié)構(gòu)的表征在上期已經(jīng)詳述，是拉曼zui為優(yōu)勢的領(lǐng)域之一；而特殊官能團也可通過其對應(yīng)的拉曼指紋峰來進行指示。

不同特殊官能團對應(yīng)不同拉曼指紋峰

有機材料的分析

如下圖，試樣為聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)和聚苯乙烯(PS)的共混膜。如果是用傳統(tǒng)電鏡觀察，可以憑借經(jīng)驗，根據(jù)形貌來大致區(qū)分兩者，但是這僅僅是依靠經(jīng)驗判斷，并無有效的證據(jù)。除此之外，EDS等附件并不能確切的給出區(qū)分兩相的有力數(shù)據(jù)。

而用RISE分析卻有了明顯的進步，在觀察到的區(qū)域可以進行拉曼光譜面掃描。PMMA和PS雖然都是有機材料，不過碳骨架結(jié)構(gòu)和部分官能團的結(jié)構(gòu)卻有著較大的差異。PMMA化學(xué)式是-[CH2C(CH3)(COOCH3)]n-，PS為(C8H8) n。

聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)和聚苯乙烯(PS)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

PMMA有特征的C=O結(jié)構(gòu)、CH3伸縮振動，而PS有特征的苯環(huán)的環(huán)呼吸振動、苯環(huán)內(nèi)碳原子的非對稱振動、苯環(huán)C-H的伸縮振動。這些振動對應(yīng)的拉曼峰分別位于1727cm-1、2951cm-1、1000cm-1、1600cm-1、3052cm-1，這些峰即可作為兩項的特征峰輕易的將兩項進行區(qū)分。

通過拉曼特征峰輕易區(qū)分PMMA和PS

此外，很多有機物都有特征性的骨架結(jié)構(gòu)和官能團，這些均可作為拉曼光譜的特征峰用RISE進行分析。

有機物中特征骨架結(jié)構(gòu)和官能團對應(yīng)特征拉曼峰

再比如，RISE也可輕易區(qū)分下圖有機物中的聚羥基丁酸酯(紅色)和聚乳酸(藍色)。

通過拉曼特征峰區(qū)分聚羥基丁酸酯(紅色)和聚乳酸(藍色)

生命科學(xué)的分析

在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中也經(jīng)常需要用到掃描電鏡，尤其是染色的細胞切片組織通過掃描電鏡觀察，可以通過形貌襯度判斷細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。然而除了形貌照片之外，沒有更多的分析數(shù)據(jù)也困擾著這一類方向的研究。

然而RISE技術(shù)仍可以在此基礎(chǔ)上進行進一步的拓展，很多生命試樣的特征結(jié)構(gòu)也都有特征的物質(zhì)組成，比如特征的蛋白、脂類等等，還是可以由特征的有機物及其對應(yīng)的特征拉曼光譜作為指紋標(biāo)記。

如下圖，可以將細胞切片組織在形貌的基礎(chǔ)上進行RISE表征，進一步區(qū)分出細胞核、細胞間隙和高濃度磷脂。

通過RISE技術(shù)表征細胞切片組織中不同物質(zhì)

再比如下圖，試樣為眼蟲細胞。在獲得SEM圖像之后再通過拉曼光譜獲得RISE圖像，可以進一步分析出其中的葉綠體、蛋白質(zhì)、細胞核、副淀粉等物質(zhì)。

眼蟲細胞中不同物質(zhì)的RISE表征分析

醫(yī)工交叉

目前學(xué)科交叉是科學(xué)研究的發(fā)展趨勢，其中醫(yī)工交叉也是備受關(guān)注的方向。醫(yī)工交叉的科學(xué)研究中有大量的新材料和仿生材料，這也是僅靠傳統(tǒng)SEM系統(tǒng)無法*表征清楚的。而RISE系統(tǒng)在這方面就大有了用武之地。

如下圖，某仿生材料，用戶除了關(guān)心其形貌特征外，也關(guān)心其中的膠原和礦化膠原的分布。其特征峰主要在627cm-1、1601cm-1，其特征峰強度分布如圖，除此之外還有420-460cm-1、2938-2941cm-1等其他特征峰，可以進行更加細微結(jié)構(gòu)的判斷。zui終得到了膠原和礦化膠原，以及細微結(jié)構(gòu)不同的(礦化)膠原的分布圖和電鏡形貌混合的RISE圖像。

仿生材料中膠原及不同細微結(jié)構(gòu)的礦化膠原分布分析

食品安全

食品安全及其相關(guān)領(lǐng)域已經(jīng)成為大眾非常關(guān)心的問題以及檢測領(lǐng)域遇到的新問題，比如三聚氰胺奶粉、蘇丹紅等問題。然后可惜的是在食品安全及相關(guān)領(lǐng)域，用戶更關(guān)系的是化學(xué)結(jié)構(gòu)分析而非形貌和元素成分，因此掃描電鏡很難在此領(lǐng)域的檢測上發(fā)揮作用。

如下圖，某品牌嬰兒奶粉，對其中部分區(qū)域進行RISE成像，發(fā)現(xiàn)其中的空氣液泡、脂類、磷酸、胡蘿卜素、蛋白質(zhì)、膽固醇、甘油三酯等物質(zhì)的分別。

嬰兒奶粉中不同物質(zhì)的RISE表征分析

RISE拉曼-電鏡一體化系統(tǒng)相比一般的掃描電鏡系統(tǒng)，對有機物的分析能力有了極大的拓展，通過有機物的碳骨架結(jié)構(gòu)和特殊官能團對應(yīng)的拉曼指紋峰來進行指示，結(jié)合形貌表征，從而實現(xiàn)對于有機材料的結(jié)構(gòu)解析。

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《RISE大招》系列

下期將帶大家開啟RISE二維材料分析

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TESCAN發(fā)源于zui大的電鏡制造基地-捷克Brno，是電子顯微鏡及聚焦離子束系統(tǒng)領(lǐng)域的跨國公司，有超過60年的電子顯微鏡研發(fā)和制造歷史，是掃描電子顯微鏡與拉曼光譜儀聯(lián)用技術(shù)、聚焦離子束與飛行時間質(zhì)譜儀聯(lián)用技術(shù)以及氙等離子聚焦離子束技術(shù)的*，也是行業(yè)領(lǐng)域的技術(shù)。

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